壓力不穩是高壓液相色譜儀(HPLC)zui為常見(jiàn)的故障,總結原因不外乎以下四種情況:
*種情況【系統沒(méi)有穩定】:一般是在開(kāi)機的一段時(shí)間內出現,往往是流動(dòng)相在色譜柱內還沒(méi)有平衡好、柱箱溫度還沒(méi)有恒定。這些都不屬于儀器問(wèn)題,只要多平衡一會(huì )就會(huì )穩定。若使用的是梯度程序,由于流動(dòng)相的比例正處在變化中,壓力也會(huì )跟隨變化。
第二種情況【有氣泡】:氣泡的產(chǎn)生是由于流動(dòng)相中溶解了空氣,在泵壓的作用下空氣會(huì )分離出來(lái),氣泡留在泵體內排不出去,它不僅影響到流量的準確,泵壓也會(huì )不穩,這時(shí)我們上海色譜網(wǎng)技術(shù)人員只要打開(kāi)排廢閥,利用快速沖洗功能很快就能將氣泡趕出。
為防止氣泡產(chǎn)生,的辦法就是使用在線(xiàn)脫氣裝置。沒(méi)有脫氣機時(shí),流動(dòng)相要經(jīng)過(guò)脫氣處理。超聲波震蕩是常用的除氣泡方法,雖然簡(jiǎn)單但效果不佳,不妨將流動(dòng)相用微孔濾膜多過(guò)濾兩遍,利用真空泵的負壓,將溶解在流動(dòng)相中的空氣釋放出來(lái),其效果要好些。
如果使用中我們上海色譜網(wǎng)技術(shù)人員發(fā)現,連接過(guò)濾頭的輸液管中有微小的氣泡流動(dòng)時(shí),這說(shuō)明過(guò)濾頭有堵塞現象必須清洗,你可用10%的硝酸進(jìn)行超聲15分鐘,如果還有氣泡產(chǎn)生那就該換新濾頭了。其次,要檢查的是輸液泵有沒(méi)有漏液現象,一般接在泵后的管道漏液會(huì )使壓力降低,對壓力穩定性影響不大。如果泵內柱塞墊或柱塞桿磨損了那就不一樣了,它不僅壓力上不去、變化大、流量也不足。只要觀(guān)察到泵頭或沖洗管漏液(有沖洗瓶時(shí)液位會(huì )升高),柱塞墊或柱塞桿肯定有問(wèn)題。
第三種情況【單向閥出現問(wèn)題】 :當有鹽份或者雜質(zhì)等污染物附著(zhù)在單向閥內球體和閥體表面時(shí),就會(huì )破壞密封性,造成輸液的單向性能降低,泵雖然在工作,但就是輸送不好液體,嚴重時(shí)不能輸液。反映到壓力上,表現為嚴重不穩或沒(méi)有壓力。這時(shí)你可以卸下單向閥,用異丙醇超聲清洗20分鐘。如果有鹽份,再用熱水超聲清洗一遍效果會(huì )更好。若清洗后還達不到要求,可將單向閥再接到流路上用大流量異丙醇沖洗。單向閥的結構比較精細,如果沒(méi)有把握先不要分解清洗,用超聲波清洗時(shí)要注意擺放的位置防止部件震散,否則裝配后效果會(huì )不理想。當單向閥內的球體損傷時(shí)就只有更換了。
第四種情況【泵工作的相位問(wèn)題】 :這種情況發(fā)生的比較少,可以通過(guò)調節泵的初始位置解決。