熒光分光光度計測試注意事項
更新時(shí)間:2017-11-11 點(diǎn)擊次數:4134次
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數,從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結構情況。應用于科研、化工、醫藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學(xué)實(shí)驗等領(lǐng)域。
熒光強度容易受外界因素的影響,如樣品池、激發(fā)光源、溫度、溶液的pH值、溶劑性質(zhì)、其它溶質(zhì)、表面活性劑等都會(huì )造成熒光強度的變化。嚴格控制測試條件對熒光分析來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。
熒光分光光度計測試注意事項:
①樣品應盛在四面透光的石英比色皿(熒光池)中,如果是揮發(fā)性樣品應使用帶塞的熒光池。
②在熒光分析時(shí),為了得到穩定可靠的數據,一般需要開(kāi)機預熱氙燈大約30min。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈,預熱時(shí)間可以縮短到10min左右。對某些易感光、易分解的熒光物質(zhì),盡量采用長(cháng)波長(cháng)、低人射光強度及短時(shí)間光照。
③溫度變化可引起熒光強度的改變。通常降低溫度,有利于提高熒光量子產(chǎn)率,熒光強度增大。溫度影響熒光強度的顯著(zhù)程度因樣品而異,大部分熒光物質(zhì)的熒光強度受溫度影響不大,測試溫度變化不超過(guò)±3℃,對測試結果幾乎無(wú)影響。
④當熒光物質(zhì)是弱酸或弱堿時(shí),溶液的pH對熒光強度有較大影響。因為弱酸或弱堿在不同酸度中,分子和離子的電離平衡會(huì )發(fā)生改變,而熒光物質(zhì)的熒光強度會(huì )因其離解狀態(tài)發(fā)生改變。
⑤分子結構中存在π-π共軛的熒光物質(zhì)在極性溶劑中,熒光效率顯著(zhù)增強。溶液中表面活性劑的加入能夠顯著(zhù)提高熒光強度。
⑥測試過(guò)程中注意不要肉眼盯著(zhù)氙燈光源看,以防對眼睛造成損傷。
⑦儀器房應注意經(jīng)常通風(fēng),避免產(chǎn)生的臭氧在室內富集。