注射進(jìn)樣量/注射進(jìn)樣體積

    樣品質(zhì)量或體積過(guò)載和使用錯誤的樣品溶劑都會(huì )造成色譜柱性能的顯著(zhù)降低，由此損害分離效果。注射進(jìn)樣體積不得超過(guò)流速的10%（比如，在流速為1毫升/分鐘時(shí)，注射進(jìn)樣體積<100微升）。樣品進(jìn)樣量高出吸附等溫線(xiàn)的線(xiàn)性部分就意味著(zhù)上樣量過(guò)載。這條分界線(xiàn)不一而足，原則上，每毫升柱體積上不得承載超過(guò)0.01毫克的樣品（比如，在4.6 X 250 毫米色譜柱上zui大上樣量為22微克）。如果因為檢測精度需要，上樣量還是可以再上調。樣品溶劑內的強移動(dòng)相組分（反相模式下脂肪醇、乙腈，或者正相模式下脂肪醇、乙酸乙酯等）含量不得超過(guò)它們在工作移動(dòng)相中的濃度。

額外柱體積/死體積

    塔板數低下的原因通常是因為死體積過(guò)大。死體積是一下這些部分工作體積的總和，樣品注射器，包括樣品環(huán)，連接注射器和色譜柱的導管，連接色譜柱和貫流分析池的導管，貫流分析池，再加上配件、接頭和線(xiàn)程內濾膜所產(chǎn)生的空間。內徑為0.010”的導管在液相色譜系統中zui常見(jiàn)。如果使用鉆孔更細（內徑<3.0毫米）的色譜柱，可以將內徑為0.010”的導管更換成內徑為0.007”的導管以減少死體積，從而提高色譜性能。使用內徑為0.005”的導管可以進(jìn)一步減少死體積，但就是操作上不太方便。使用內徑小于0.007”的導管對流速有所限制，當緩沖鹽分沉淀析出時(shí)會(huì )帶來(lái)麻煩。如果您正使用多種品牌的液相色譜柱，請確認用以連接色譜柱的配件是否剛好配套。如果您的色譜系統使用的是不銹鋼導管和配件，在連接色譜柱前，請在核對色譜柱的品牌后選擇正確的配件并預先裝配好。如果您的色譜系統使用的是聚醚醚酮材料的導管和配件，比較理想的方式是在每次更換色譜柱的時(shí)候，選擇在新切下的聚醚醚酮導管上安裝全新的聚醚醚酮配件，以確保它們之間匹配。