1、 色譜柱的使用說(shuō)明：

        （1）、色譜柱使用前注意事項：色譜柱的儲存液無(wú)特殊說(shuō)明，均為評價(jià)報告所示的流動(dòng)相。在使用前，一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應先用10％左右的低濃度的有機相洗脫劑過(guò)渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出，堵塞色譜柱。

         （2）、流動(dòng)相：流動(dòng)相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純，配流動(dòng)相的水是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動(dòng)相再經(jīng)過(guò)0.45μm的濾膜過(guò)濾一次則更好，尤其是含鹽的流動(dòng)相。另外，裝流動(dòng)相的容器和色譜系統中的在線(xiàn)過(guò)濾器等裝置應該定期清洗或更換。以常規硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的PH值適用范圍是2.0-8.0，BDS C18適合于堿性化合物，PH值適用范圍為2.0-10.0。當必須要在PH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時(shí)，每次使用結束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑清洗，并*置換掉原來(lái)所使用的流動(dòng)相。  

        （3）、樣品：樣品也要盡可能清潔，可選用樣品過(guò)濾器或樣品預處理柱（SPE）對樣品進(jìn)行預處理；若樣品不便處理，要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時(shí)，所有的溶劑和樣品應嚴格脫水。

         2、 色譜柱的保存

        （1）、反相色譜柱每天實(shí)驗后的保養：使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相，實(shí)驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇沖洗30分鐘。注意：不能用純水沖洗柱子，應該在水中加入10%的甲醇，防止將填料沖塌陷。

       （2）、長(cháng)期保存色譜柱：如色譜柱要長(cháng)時(shí)間保存，必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以?xún)Υ嬗诩兗状蓟蛞译嬷?，正相柱可以?xún)Υ嬗趪栏衩撍蟮募冋和橹?，離子交換柱可以?xún)Υ嬗谒ê栏瘎┋Bdan化鈉 ）中，并將購買(mǎi)新色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上。儲存的溫度是室溫。

         3、 色譜柱的再生因為色譜柱是消耗品，隨著(zhù)使用時(shí)間或進(jìn)樣次數的增加，會(huì )出現色譜峰高降低，峰寬加大或出現肩峰的現象，一般來(lái)說(shuō)可能是柱效下降。

       （1）、反相柱的再生：依次采用20-30倍的色譜柱體積的甲醇：水=10：90 （V/V），乙腈，異丙醇作為流動(dòng)相沖洗色譜柱，完成后再以相反順序沖洗色譜柱。

       （2）、正相柱的再生：依次以20-30倍色譜柱的體積的正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作為流動(dòng)相沖洗色譜柱，然后再以相反的順序沖洗色譜柱。要注意上述溶劑必須嚴格脫水。

          4、 色譜柱在使用過(guò)程中易出現的問(wèn)題和解決辦法

         色譜柱在使用中zui常見(jiàn)的問(wèn)題就是柱壓升高，如果柱壓是在長(cháng)時(shí)間使用過(guò)程中緩慢增加，屬于正?，F象。但柱壓在使用過(guò)程中突然升高（系統管路堵塞及壓力傳感器故障除外），可能的原因有如下幾點(diǎn)：

        （1）、色譜柱頭的過(guò)濾篩板堵塞或污染；

        （2）、色譜柱頭的填料被樣品污染；

        （3）、色譜柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑，形成結晶析出；

        （4）、流動(dòng)相PH值過(guò)大或過(guò)小使固定相結構破壞或溶解。

          解決辦法如下：

          （1）、如確定是色譜柱頭的過(guò)濾篩板被污染，可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力，或者卸下色譜柱頭，將其放在10％的稀硝酸內超聲清洗10分鐘，后再用純水超聲10分鐘，重新裝入色譜柱。

          （2）、如確定色譜柱頭的填料被污染，將柱頭螺絲卸下，挖出柱內前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔細修復后，重新安裝上柱頭螺絲。

         （3）、如確定定是鹽結晶，用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內鹽全部溶解，再換高濃度甲醇。

         （4）、如果因PH值使用不當，很難恢復。