液相色譜柱在使用前，最好進(jìn)行柱的性能測試，并將結果保存起來(lái)，作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照液相色譜柱出廠(chǎng)報告中的條件進(jìn)行，只有這樣，測得的結果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。

 

　　1、樣品的前處理：

　?、僮詈檬褂昧鲃?dòng)相溶解樣品；

　?、谑褂妙A處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)；

　?、凼褂?.45μm或0.22μm的過(guò)濾膜過(guò)濾除去微粒雜質(zhì)。

 

　　2、流動(dòng)相的配制：

　　液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的，因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn)：

　?、倭鲃?dòng)相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會(huì )沉淀在柱中；

　?、诹鲃?dòng)相與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應；

　?、哿鲃?dòng)相的黏度要盡量小，以便得到好的分離效果；降低柱壓降，延長(cháng)泵的使用壽命；

　?、芰鲃?dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器，最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制；

　?、萘鲃?dòng)相沸點(diǎn)不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導致實(shí)驗無(wú)法進(jìn)行；

　?、拊诹鲃?dòng)相配制好后，一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

 

　　3、流動(dòng)相流速的選擇：

　　因柱效是柱中流動(dòng)相線(xiàn)性流速的函數，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的液相色譜柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。對內徑為4.6mm的液相色譜柱，流速一般選擇1ml／min，對于內徑為4.0mm柱，流速0.8ml／min為佳；

　　當選用最佳流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長(cháng)?？刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強度的方法以縮短分析時(shí)間。